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새로운 Global regulator Spx에 의한 Bacillus의 transcriptional control 연구
이 보고서는 한국연구재단(NRF, National Research Foundation of Korea)이 지원한 연구과제( 새로운 Global regulator Spx에 의한 Bacillus의 tranional control 연구 | 2004 년 신청요강 다운로드 PDF다운로드 | 최순용(한남대학교) ) 연구결과물 로 제출된 자료입니다.
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연구과제번호 F00001
선정년도 2004 년
과제진행현황 종료
제출상태 재단승인
등록완료일 2005년 12월 23일
연차구분 결과보고
결과보고년도 2005년
결과보고시 연구요약문
  • 국문
  • Bacillus의 Spx단백질은 세포내 oxidative stress에 대항하여 genome수준에서 양성, 음성 전사조절에 관여한다. 유기황 화합물의 유입과 탈황에 관련된 ytmI, yxeL, ssu operon과 같은 유전자들은 sulfate나 cysteine을 유일한 sulfur source로 주었을 때 발현이 억제된다. ytmI operon과 이의 양성조절인자인 ytlI의 발현은 sulfate가 포함된 배지에서 Spx-dependent mechanism에 의하여 억제된다. 본 연구에서는 yrzC가 ytmI operon의 음성 발현조절에 관여하는 것을 밝혔다. yrzC 단백질이 불활성화되면 ytmI operon의 발현은 sulfate나 cysteine이 있음에도 불구하고 억제되지 않는다. 이러한 현상은 ytmI operon에 대하여 Cys-dependent repression을 나타내는 spx mutant와는 대조적이다. yrzC는 ytlI의 발현에 대한 음성 조절인자로 작용하며, 따라서 ytmI operon에 대하여 간접적으로 발현을 억제한다. yrzC 단백질의 양은 spx mutant에서 wild type에 비해 약 1/3가량 감소하며 이것이 spx mutant에서 ytmI operon의 발현이 derepression되는 것과 연관이 있을 것으로 추측한다. 또한 alanine-scanning mutagenesis를 통하여 RNA polymerase의 alpha-subunit C-terminal domain K267 잔기에 Spx에 결합하여 ComA와 CTD의 상호작용을 방해함으로써 srf의 전사를 억제함을 밝혔다.
  • 영문
  • Spx protein exerts both positive and negative transcriptional control over a genome-wide scale in response to oxidative stress. Genes such as ytmI, yxeL, and ssu operons, which encode proteins that function in the uptake and desulfurization of organic sulfur, are repressed when sulfate or cysteine is present as a sole sulfur source. Both the ytmI operon and ytlI gene, encoding a regulator that positively controls the ytmI operon, are repressed by an Spx-dependent mechanism in sulfate-containing medium. In this study, yrzC is a another negative regulator of the ytmI operon. When yrzC was inactivated, the expression of the ytmI operon was derepressed in the presence of either sulfate or cysteine. This is in contrast to an spx mutant, which still exhibits Cys-dependent transcriptional repression. The amount of yrzC protein in spx mutant was decreased to one third of wild type, and suggest that it is hard to repress the expression of ytlI with the reduced amount of yrzC in spx mutant. Alanine-scanning mutagenesis of B. subtilis alpha CTD of RNA polymerase uncovered K267 residue is required for Spx function and ComA-dependent srf transcriptional activation.
연구결과보고서
  • 초록
  • Bacillus의 Spx단백질은 세포내 oxidative stress에 대항하여 genome수준에서 양성, 음성 전사조절에 관여한다. 유기황 화합물의 유입과 탈황에 관련된 ytmI, yxeL, ssu operon과 같은 유전자들은 sulfate나 cysteine을 유일한 sulfur source로 주었을 때 발현이 억제된다. ytmI operon과 이의 양성조절인자인 ytlI의 발현은 sulfate가 포함된 배지에서 Spx-dependent mechanism에 의하여 억제된다. 본 연구에서는 yrzC가 ytmI operon의 음성 발현조절에 관여하는 것을 밝혔다. yrzC 단백질이 불활성화되면 ytmI operon의 발현은 sulfate나 cysteine이 있음에도 불구하고 억제되지 않는다. 이러한 현상은 ytmI operon에 대하여 Cys-dependent repression을 나타내는 spx mutant와는 대조적이다. yrzC는 ytlI의 발현에 대한 음성 조절인자로 작용하며, 따라서 ytmI operon에 대하여 간접적으로 발현을 억제한다. yrzC 단백질의 양은 spx mutant에서 wild type에 비해 약 1/3가량 감소하며 이것이 spx mutant에서 ytmI operon의 발현이 derepression되는 것과 연관이 있을 것으로 추측한다.
  • 연구결과 및 활용방안
  • 연구결과
    1. ytmI operon의 발현에 영향을 미치는 양성 조절인자가 ytlI임을 밝혔다.
    2. ytmI operon의 또 다른 조절인자 yrzC를 클로닝하였다.
    3. yrzC는 ytlI 유전자에 대한 음성 조절인자로서 ytmI operon의 발현을 간접적으로 조절함을 밝혔다.
    4. Spx mutant에서 yrzC의 발현이 감소됨을 yrzC-lacZ fusion assay, Primer extension analysis로 확인하였다.
    5. Spx가 yrzC의 발현을 조절하는 주요 인자이다.
    6. yrzC는 ytlI 뿐만 아니라 ytmI을 발현을 직접적으로 억제하는 작용을 한다.
    7. Spx는 RNA polymease의 αCTD K267에 결합하여 ComA-αCTD의 상호작용을 방해함으로써 srf의 발현을 음성 조절한다.


    활용방안
    1. yrzC의 기능 및 구조에 관한 기초 연구
    2. Organosulfur compound의 세포내 이용 pathway 연구
  • 색인어
  • Spx, yrzC, organosulfur utilization, Bacillus, transcription control, RNA polymerase
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